Радиоаллергосорбентный тест (pact)

PACT проводится с неинфекционными аллергенами.
Оборудование и реактивы: стандартизированный диагностический набор «Phadebas RAST» шведской фирмы «Pharmacia Diagnostics», гамма-счетчик с коэффициентом эффективности 50%, пластиковые пробирки с круглым дном и внутренним диаметром 10 мм.
Техника: 1) в пробирки с № 5 по № 1Р помещают по одному эталонному диску; 2) в пробирки с № 11 по № 53 помещают по одному аллергенному диску; 3) автоматической микропипеткой на 0,05 мл вносят в пробирки с № 3 по № 10 эталонные сыворотки А, В, С, D (две пробирки на каждую сыворотку); 4) в пробирки с № 11 по № 53 вносят по 0,05 мл исследуемых сывороток. Все пробирки покрывают фольгой и оставляют на 3 часа при комнатной температуре; 5) по истечении указанного времени из всех пробирок удаляют жидкость многоканальным аспиратором или пастеровской пипеткой, присоединенной к водному аспиратору, и добавляют во все пробирки, начиная с № 3 по № 53, по 2,5 мл приготовленного раствора соли (9 г NaCl на 1000 мл дистиллированной веды) из набора для промывания. Через 10 минут водным аспиратором удаляют промывочную жидкость и повторяют процедуру дважды; 6) на дно каждой пробирки, включая 1 и 2. добавляют автоматической микропипеткой по 0,05 мл раствора анти-Ig Е—1 1125. При этом пробирки № 1 и № 2 немедленно прикрывают пробкой и оставляют, так как по ним в дальнейшем определяют особую радиоактивность. Все остальные пробирки прикрывают фольгой и оставляют на ночь при комнатной температуре; 7) на следующее утро содержимое всех пробирок, исключая № 1 и № 2, промывают три раза приготовленным раствором соли, как было изложено выше. Тщательно удалив промывочную жидкость водным аспиратором, пробирки закупоривают и закладывают в гамма-счетчик в возрастающем порядке. По результатам гамма-счетчика определяют связанную радиоактивность. Оценка производится по сравнению с эталонными сыворотками А— D. Чем больше связанной радиоактивности, тем выше содержание специфических lg Е в крови больного.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
SQL - 67 | 0,731 сек. | 12.77 МБ